Composición

Composición cualitativa y cuantitativa

Inmunoglobulina antirrábica fluorescente con un título de trabajo ≥1: 8.

Forma farmacéutica

Liofilizado.

IMMUNOEFECTO biológico

El kit de prueba se utiliza para diagnosticar la rabia in vitro.

Especies animales

Las globulinas están destinadas a detectar el antígeno del virus de la rabia en el material patológico de todas las especies animales.

lndication

El kit se utiliza para diagnosticar la rabia en el ensayo de inmunofluorescencia (IFA).

Microscopio luminiscente, portaobjetos de vidrio, pipetas de medición 1; 2; 5; 10 ml, matraces graduados de laboratorio, platos bacteriológicos, ftalato de dimetilo, acetona químicamente pura o pura para análisis, solución salina tamponada con fosfato (PBS) pH 7.2-7.4; "RABITEST-FAT" - globulina antirrábica fluorescente; Controles positivos y negativos

Preparación de solución salina tamponada con fosfato pH 7.2-7.4:

PBS se prepara de acuerdo con la siguiente receta: fosfato disódico (anhidro) - 1.25 g, fosfato de potasio monosustituido - 0.272 g, cloruro de sodio - 8.5 g, agua destilada - hasta 1000 cm³

Preparación de las muestras del material de ensayo:

Para estudiar, los frotis o huellas se preparan a partir de diferentes partes del cerebro fresco o fresco congelado (pre• descongelado) del animal (cuernos de amonio, cerebelo, bulbo raquídeo, corteza de los hemisferios grandes) utilizando portaobjetos preengrasados. Se preparan al menos dos frotis o huellas de cada parte del cerebro.

Las muestras de cerebro de animales en la etapa de descomposición, conservadas con glicerina, fijadas con metilo

o alcohol etílico, formalina u otras sustancias que contribuyen a la aparición de fluorescencia no específica no se pueden usar para realizar pruebas.

Para hacer frotis, las piezas del cerebro que pesan 0.5-1.0 g de las partes mencionadas anteriormente del cerebro se muelen en un mortero hasta que se forma una masa homogénea, a partir de la cual posteriormente se preparan frotis delgados en portaobjetos.

Para hacer huellas: con unas tijeras se cortan trozos de tejido con un tamaño de 5 mm2 a 10 mm2 del Indique partes del cerebro, luego colóquelas en papel de filtro doblado en 4-6 capas para eliminar el exceso de humedad. La superficie cortada se toca 3-4 veces con una diapositiva, apenas presionándola, hasta que se obtiene una impresión delgada en la diapositiva.

Para hacer los controles negativos, se usan los frotis o huellas de los cerebros de ratones sanos (no infectados y sin vacunar contra la rabia). 

Las muestras de control positivo se preparan a partir de los cerebros de ratones inoculados con la cepa de referencia CVS del virus de la rabia, o de material positivo probado de antemano. Los cerebros de ratones inoculados se seleccionan en la etapa de agonía.

Después de la preparación, los frotis o impresiones se secan al aire a temperatura ambiente y luego se fijan con acetona a una temperatura de menos 20ºC durante 30-60 minutos.

Ensayo de lmunofluorescencia:

La globulina antirrábica fluorescente liofilizada "RABITEST-FAT" se reconstituye con agua destilada hasta el volumen inicial indicado en la etiqueta.  Luego, prepare una dilución funcional de globulina, indicada en la etiqueta, agregando el volumen requerido de 0.01 M PBS.

Para el estudio, se utilizan frotis o huellas, que se recubren mediante la dilución de trabajo de «RABITEST-FAT», globulina antirrábica fluorescente. La solución de globulina se extiende uniformemente sobre toda la superficie de la muestra preparada, utilizando una pipeta en una cantidad de 0,1 ± 0,01 cm3 por muestra.

Las muestras preparadas se colocan en una cámara húmeda y se mantienen en un termostato durante 30 minutos a una temperatura de 37 ° C.  Al mismo tiempo, las muestras de control se tiñen. Después de 30 minutos, las globulinas fluorescentes se lavan con agua destilada; las diapositivas con frotis se lavan con PBS (pH 7.2-7.4) tres veces durante 10 minutos, cambiando PBS. Después de esto, las muestras teñidas se enjuagan con agua destilada, se secan al aire y se examinan bajo Un microscopio fluorescente (en inmersión) en un espectro azul-verde.  Para ello, se utiliza aceite no fluorescente o glicerina para microscopía de fluorescencia.

El diagnóstico de rabia se considera positivo si se detectaron al menos 10 gránulos fluorescentes típicos en varios campos de visión del microscopio en ausencia de luminiscencia específica en los controles negativos y la presencia de gránulos típicos en los controles positivos.

Uso durante el embarazo, lactancia, puesta de huevos

No existe.

Dosis y vías de administración

LT se utiliza para el diagnóstico in vitro de acuerdo con el prospecto.

Precauciones especiales

Solo el personal vacunado puede realizar diagnósticos de rabia.

Tiempo de espera

No existe.

Formas de incompatibilidad

No detectado.

Vigencia

24 meses. El kit de prueba se almacena en un lugar oscuro a una temperatura de +2º a +8ºC.

Condiciones de almacenamiento

Después de la reconstitución, la globulina fluorescente puede almacenarse a +2º a +8ºC durante no más de 24 horas, o congelarse a una temperatura no superior a menos 12ºC durante un máximo de 14 días. No exponer a la luz.  Mantener fuera del alcance de los niños.